Qalabka Go'doominta Dhirta ee RNA Wadarta Qalabka RNA Purificaiton ee Dhirta Ku Yar ee Polysaccharides iyo Polyphenols
Tilmaamaha
50 Diyaarin, 200 Diyaarin
Qalabku wuxuu isticmaalaa tiirka lafdhabarta iyo caanaha ay soo saartay Foregene, kaas oo si hufan uga soo saari kara nadiif sare iyo wadarta guud ee RNA ee unugyada dhirta kala duwan oo leh polysaccharides hooseeya iyo polyphenols.Muunada dhirta leh polysaccharides sare ama polyphenols, waxaa lagu talinayaa in la isticmaalo Plant Total RNA Isolation Plus Kit si aad u hesho natiijooyin wanaagsan oo soo saarista RNA.Qalabku wuxuu bixiyaa tiirka DNA-Nadiifinta kaas oo si fudud uga saari kara DNA-da genomic ee sare iyo unugyada lysate.Tiirka RNA-kaliya ayaa si wax ku ool ah u xidhi kara RNA.Qalabku wuxuu baari karaa tiro badan oo muunado isku mar ah.
Nidaamka oo dhan kuma jiro RNase, sidaa darteed RNA la safeeyey ma hoos u dhacayso.Buffer PRW1 iyo Buffer PRW2 waxay hubin karaan in RNA-ga la helay aanu ku wasakhaysan borotiin, DNA, ion, iyo xeryahooda organic.
Qaybaha kitka
| Buffer PSL1, Buffer PS, Buffer PSL2 |
| Buffer PRW1, Buffer PRW2 |
| RNase-free ddH2O, Tiirka Nadiifinta DNA |
| Tiirka RNA-Kaliya |
| Tilmaamaha |
Tilmaamaha & faa'iidooyinka
■ Ku shaqeynta heerkulka qolka (15-25 ℃) inta lagu guda jiro habka oo dhan, iyada oo aan baraf lagu qubeyn iyo heerkulka hoose.
■ Qalabka RNase-free oo dhameystiran, looma baahna in laga walwalo xaalufka RNA.
Tiirka Nadiifinta DNA-da ayaa si gaar ah ugu xidhan DNA-da, si uu xidhmoku uga saaro wasakhaynta DNA-da iyada oo aan lagu darin DNA-da.
∎ Wax-soo-saarka RNA sare: Tiirka-RNA-kaliya iyo caanaha gaarka ah ayaa si hufan u nadiifin kara RNA.
■ Xawaaraha dheereeya: fududahay in lagu shaqeeyo waxaana lagu dhameyn karaa 30 daqiiqo gudahood.
■ Badbaadada: looma baahna reageent organic.
■ Tayada sare: Qaybaha RNA ee la safeeyey waa nadiif sare, ka madhan borotiin iyo wasakh kale, waxayna la kulmi karaan codsiyo tijaabo ah oo kala duwan.
Codsiga qalabka
Waxay ku habboon tahay ka-saarista iyo nadiifinta wadarta RNA ee muunado unug warshadeed cusub ama barafaysan (gaar ahaan unugyada caleenta geedka cusub) oo leh polysaccharide hoose iyo ka kooban polyphenol.
Socodka shaqada
Jaantuska
Plant Total RNA Go'doominta Qalabka Plus waxa uu farsameeyay 50mg oo caleemo cusub ah oo polysaccharides iyo polyphenols ah, iyo 5% RNA la safeeyey ayaa lagu tijaabiyay electrophoresis.
1: Mooska
2: Ginkgo
3: Cudbi
4: rummaanka
Kaydinta iyo nolosha shelf
Qalabka waxaa lagu kaydin karaa 12 bilood heerkulka qolka (15-25 ℃) meel qalalan, iyo 2-8 ℃ waqti dheer (24 bilood).
Buffer PSL1 waxa lagu kaydin karaa 4 ℃ 1 bil kadib marka lagu daro 2-hydroxy-1-ethanethiol(ikhtiyaar).
Tilmaamaha Falanqaynta Dhibaatada
Falanqaynta soo socota ee dhibaatooyinka laga yaabo inaad la kulantoWadarta DhirtaRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
Tiirka lafdhabarta ayaa xiran
Xannibaadda tiirka lafdhabarta waxay sababi doontaa in wax-soo-saarka RNA la dhimo ama xitaa aan la nadiifin karin si loo helo RNA, tayada RNA ee la helayna waxay noqon doontaa mid hooseeya.
Falanqaynta Sababta Caadiga ah:
1. Muunadu si buuxda uma jabin.
Kala qaybsanaanta muunada aan dhamaystirnayn waxay xannibi kartaa Tiirka Nadiifinta DNA, kaas oo sidoo kale saamayn kara wax-soo-saarka RNA iyo tayada.Waxaan ku talinaynaa marka la samaynayo kala qaybsanaanta muunada, si dhakhso ah u shiiddo xaddi ku filan oo nitrogen dareere ah si ay u burburiso unugyada sida gidaarada unugyada iyo xuubabka unugyada shaybaarada intii suurtogal ah.Tusaalooyinka dhirta ee polyphenol polysaccharides, waxaan kugula talineynaa inaad isticmaasho Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
2. U hilow tiirka-nadiifinta DNA-ga oo go'doonsan, hamiso qolofka qashinka unugyada ee suurtogalka ah.
Pellet-ka burburka unug ee la damiyey waxa uu xidhi karaa tixda-RNA-kaliya inta lagu jiro hababka xayeysiinta RNA (eeg tallaabada 5 ee habraaca, tallaabada 6 ee nidaamka polyphenol polysaccharide).Waxaan ku talinaynaa in taxaddar la yeesho marka la haminayo maadada sare si looga fogaado in burburka unugyada la damiyo.
3. Qadarka hore ee muunadku aad buu u weyn yahay.
Isticmaalka muunada xad-dhaafka ah waxay keeni doontaa kala qaybsanaan la'aan ama lysis unugyo aan dhamaystirnayn oo ay sameeyaan Buffer PRL1 ama Buffer PSL1, taas oo keenta in tiirka nadiifinta xidhmay ee hawlgallada sifaynta.Wadarta Guud ee Qalabka Go'doominta RNA waxa uu leeyahay ugu badnaan 50 mg halkii nadiifin ee muunad la qalay.Tusaalooyinka dhirta ee polyphenol polysaccharides, waxaan kugula talineynaa inaad tijaabiso Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
4. Heerkulka centrifuge aad ayuu u hooseeyaa.
Go'doominta RNA oo dhan iyo nadiifinta marka laga reebo nitrogen dareere ah oo carqaladeeya unugyada muunada, dhammaan tillaabooyinka waxaa lagu sameeyaa heerkulka qolka (20-25 ° C).Qaar ka mid ah centrifuges heerkulka hooseeya waxay leeyihiin heerkul ka hooseeya 20 °C, taas oo keeni karta xannibaado ku jira Tiirka Nadiifinta DNA iyo/ama RNA-kaliya.Haddii ay tani dhacdo, dhig heerkulka centrifuge ilaa 20-25 °C oo horay u diiri isku darka lysis iyo/ama ku darida xad-dhaafka ah ee ethanol ilaa 37 °C.
Ma jiro RNA la soo saaray ama RNA wax soo saarka oo hooseeya
Caadi ahaan waxaa jira arrimo badan oo saameeya waxtarka soo kabashada, sida: muunadda RNA nuxurka, habka hawlgalka, mugga elution, iwm.
Falanqaynta sababaha caadiga ah sida soo socota:
1.Baraf baraf ama heerkul hooseeya (4°C) centrifugation ayaa la sameeyay intii lagu jiray qalliinka.
Talo soo jeedin: Ku shaqee heerkulka qolka (15-25°C) habka oo dhan, ha samayn baraf qubeyska iyo heerkulka hoose ee centrifugation.
2.RNA ayaa hoos u dhacday sababtoo ah ilaalinta aan habboonayn ee muunada ama ilaalinta muddada dheer ee muunada.
Talo-soo-jeedin: Saamballada cusub ee la ururiyey waa in si degdeg ah loogu barafoobay nitrogen dareere ah, ka dibna lagu kaydiyaa -80 ° C muddo dheer, iska ilaali qaboojinta soo noqnoqda iyo dhalaalidda shaybaarada;ama isla markiiba muunada ku qooy RNA stabilizer RNAlater solution (muunada xoolaha).
3.Kala qaybsanaanta muunada oo aan ku filnayn iyo lysis waxay keenaysaa xannibaadda tiirka sifaynta.
Talo-soo-jeedin: Markaad shiidayso nudaha, fadlan hubi in unuggu si ku filan dhulka u dhigay, oo si degdeg ah ugu wareeji Buffer PSL1 ee horay loo sii diyaariyey (xaqiiji in saamiga saxda ah ee β-ME lagu daray, eeg tallaabada 1 ee habraaca).
4.Eleent waxaa lagu daray si qaldan.
Soo jeedin: Hubi in RNase-free ddH2O waxa lagu daadanayaa badhtamaha xuubka tiirka sifaynta.
5.Mugga saxda ah ee ethanol buuxa laguma darin Buffer PSL2 ama Buffer PRW2.
Soo jeedin: Fadlan raac tilmaamaha, ku dar mugga saxda ah ee ethanol ee saxda ah Buffer PSL2 iyo Buffer PRW2 oo si fiican isku qas ka hor inta aan qalabka la isticmaalin.
6. Qadarka saamiga unuggu waa mid aan habboonayn.
Soo jeedin: Isticmaal 50 mg oo unug ah 500 μl ee Buffer PSL1.Isticmaalka unug aad u badan waxay yaraynaysaa cadadka RNA ee la soo saaray iyo nadiifinta RNA ka soo baxdana waa la dhimi doonaa.Waxaan si adag ugu talinaynaa in qiyaasta muunada bilowga ah aysan ka badnayn 50 mg halkii qalliinka soo saarista RNA.
7. Mugga sare-u-qaadista ee aan habboonayn ama aan dhammaystirnayn.
Soo jeedin: Mugga sare ee tiirka nadiifinta waa 50-200 μl;Haddii saamaynta sare-u-qaadista aysan ahayn mid lagu qanco, waxaa lagu talinayaa in lagu kordhiyo waqtiga heerkulka qolka ka dib marka lagu daro RNase-free ddH preheated2O, sida 5-10min
8.Tiirka nadiifinta ayaa leh haraaga ethanol ka dib markii lagu dhaqo Buffer PRW2.
Talo soo jeedin: Haddii tuubada madhan la centrifused 1 daqiiqo oo ay weli jiraan ethanol ka dib markii lagu dhaqo Buffer PRW2, waxaad kordhin kartaa wakhtiga centrifugation tuubada madhan ilaa 2 min, ama dhig tiirka sifaynta heerkulka qolka 5 min si buuxda u saaro ethanol hadhaaga ah.
9.Qalabka waxa loo isticmaalay si khaldan.
Soo jeedin: Muunada dhirta ee polysaccharides polyphenolic, adeegsiga xirmooyinka caadiga ah sida Qalabka Go'doominta RNA Wadarta Guud waxaa laga yaabaa in ay awoodi waayaan in ay helaan muunado RNA ku habboon.Waxaan kugula talineynaa inaad isticmaasho Plant Total RNA IsolationKit Plus, kaas oo si gaar ah loogu talagalay shaybaarada dhirta polyphenolic polysaccharide.Xirmad si gaar ah loogu soo saaray RNA laga soo saarayo shaybaarada dhirta polyphenol iyo polysaccharide.
Qiimaha OD260/OD280 wuu hooseeyaa
RNA ka saarida ddH2O oo loo isticmaalo akhrinta spectrophotometer natiijooyinka OD260/OD280 hoose.Waxaan kugula talineynaa isticmaalka 10mM Tris-HCl, pH 7.5 (halkii RNase-free ddH2Si aad u sarreyso RNA) si aad u hesho qiyamka OD260/OD280 ee saxda ah, ka eeg "Qiimaynta Xogta iyo Nadiifinta RNA" ee bogga 19.
RNA-da la safeeyey ayaa hoos u dhacay
Tayada RNA la safeeyey waxay la xiriirtaa arrimo ay ka mid yihiin ilaalinta muunada, faddaraynta RNase, iyo wax-is-daba marin.
Falanqaynta sababaha caadiga ah:
1. Tissue samples lama kaydin waqti ka dib ururinta.
Talo soo jeedin: Haddii shaybaarka unugyada aan la isticmaalin waqti ka dib ururinta, fadlan ku kaydi nitrogen dareere ah heerkul hoose isla markiiba ama u wareeji -80 ° C kaydinta muddada dheer ka dib marka si degdeg ah loo qaboojiyo nitrogen dareeraha ah, ama isla markiiba muunadaha ku dhex geli RNA stabilizer RNAlater xal (muunada xoolaha).Soo saarista RNA, isku day inaad isticmaasho muunado unug oo dhowaan la ururiyey.
2.Baraf soo noqnoqda iyo dhalaalida shaybaarada nudaha.
Talo soo jeedin: Marka la kaydinayo shaybaarka nudaha, waxa fiican in la googooyo qaybo yaryar si loo ilaaliyo, oo qayb iyaga ka mid ah ka soo saar marka la isticmaalayo si looga fogaado xaalufka RNA ee ay keento baraf soo noqnoqda iyo dhalaalidda shaybaarada.
3.RNase waxa lagu soo bandhigaa qolka qalliinka ama aan la xidhin galoofyada la tuuri karo, waji-xidhka, iwm.
Talo soo jeedin: Tijaabada soo saarista RNA waxa si fiican loogu sameeyaa hawlgalo kala duwan oo RNA ah, miiska shaybaadhkana waa in la nadiifiyaa ka hor tijaabada, waana in la xidho galoofyada iyo maaskaro la tuuri karo inta tijaabada lagu jiro si looga fogaado hoos u dhaca RNA ee ay keento soo bandhigida RNase ilaa xadka ugu badan.
4. Reagent-ku waxa ku wasakhoobay RNase marka la isticmaalayo.
Soo jeedin: Ku beddel taxane cusub oo ah wadarta guud ee xirmooyinka soo saarista RNA ee tijaabooyinka la xiriira.
5. Tuubooyinka centrifuge iyo talooyinka pipette ee loo isticmaalo wax-ka-beddelka RNA waxay ku wasakhoobeen RNase.
Talo soo jeedin: Hubi in tuubooyinka centrifuge, talooyinka pipette, pipettes, iwm. ee loo isticmaalo soo saarista RNA ay dhamaantood yihiin kuwo ka xor ah RNase.
Buug-tilmaameedka:
