Xaqiijinta waxqabadka asaasiga ah iyo baarayaasha marxaladda hore ee reagents PCR iyo go'aaminta xaaladaha falcelinta ugu habboon waa shuruudaha si loo hubiyo horumarka siman ee tijaabooyinka rasmiga ah.
Haddaba sidee baan ugu baahanahay inaan xaqiijino baaritaanka asaasiga ah ee marxaladda hore?
Tilmaamayaasha ugu waaweyn waa gunta hoose, qalooca cod-weyneysiinta, qiimaha ct, hufnaanta kordhinta, ogaanshaha muunada hoose ee diiradda, CV, iwm.
Asal ahaan
Asal ahaan waa xariiqda toosan ee qalooca kor u qaadida PCR.Dhowrka wareeg ee ugu horreeya falcelinta-weyneynta PCR-ga, calaamada fluorescence wax badan isma beddesho oo waxay samaysaa xariiq toosan.Xariiqan toosan waa gunta hoose.
Markaad baadhayso baarayaasha hore ee PCR, fiiro gaar ah u yeelo bal in salku yahay mid siman.Nadiifinta diiradda baaritaanka asaasiga ah waxay saameyn doontaa saldhigga, sida keenista saldhigga inuu kordho ama hoos u dhaco.Saldhiggu sidoo kale waa tilmaame dareen leh.
Qalooca Kordhinta
Tilmaame kale oo dareen leh waa qaabka qalooca cod-weyneysiinta.Way fiicantahay in la haysto qalooca S-qaabeeya si aad uga fogaato kor u qaadida sare ama qalooca kale ee weynaynta ee aan caadiga ahayn.
Ct Qiimaha
Tirada wareegyada u dhigma barta is-rog-rogid ee ka soo jeeda salka ilaa kobaca jibbaarada waa qiimaha Ct.
Isla muunadda, baadhitaanada asaasiga ah ee kala duwan waxay keenaan qaloocyada cod-weyneysiinta ee kala duwan, iyo qiimaha Ct ee u dhigma waxaa saameyn doona waxtarka-weyneynta iyo heerka faragelinta.Aragti ahaan, inta yar ee qiimaha Ct ee baaritaanka asaasiga ah ee aan dooranno, ayaa ka sii wanaagsan.
Waxtarka Waxtarka
Mid ka mid ah hababka ugu kalsoonaan karo oo xasiloon ee lagu qiimeeyo waxtarka xoojinta PCR waa qalooca caadiga ah, kaas oo sidoo kale si ballaaran loo aqoonsaday cilmi-baarayaasha.Habka waxa ku jira samaynta muunado taxane ah si loo xakameeyo tirada qaraabada ah ee qaab-dhismeedka bartilmaameedka.Tusaalooyinkan waxaa sida caadiga ah lagu sameeyaa musqulo taxane ah oo xalal kayd ah, inta badan la isticmaalo waa qasitaan 10-laab ah.Isticmaalka muunado taxane ah oo la badhxay, iyadoo la adeegsanayo barnaamijka caadiga ah ee qPCR si loo kordhiyo si loo helo qiimaha Cq, oo ugu dambeyntii sawir qalooca caadiga ah iyadoo loo eegayo fiirsashada muunad kasta iyo qiimaha Cq ee u dhigma si loo helo isla'egta toosan Cq= -klgX0+b, iyo waxtarka xoojinta E=10(-1 /k) -1.Markaad qPCR u isticmaalayso falanqaynta tirada, waxtarka kordhinta ayaa looga baahan yahay inuu ahaado inta u dhaxaysa 90%-110% (3.6>k>3.1).
Ogaanshaha Muunadaha-fiirsashada hoose
Marka fiirsashada muunadu hoos u dhacdo, heerarka ogaanshaha ee shaybaarrada asaasiga ah ee kala duwan way kala duwan yihiin.Waxaan dooranaa 20 muunado-saarid hoose si aan dib ugu soo celino, iyo nidaamka baaritaanka-primer-probe ee leh heerka ugu sarreeya ee ogaanshaha ayaa ah kan ugu fiican.
Isku-duwanaanta Kala-duwanaanta (CV)
10 muunado oo nuqul ah ayaa lagu ogaan karaa iyada oo la raacayo shaybaarro asal ah oo kala duwan iyadoo loo eegayo heerka xariiqda reagent ee ogaanshaha sii kordhinta aashitada nucleic.
Reagennada Tirada:
Saxnaanta
Saxnaanta hal dufcadood waa inay buuxisaa: isku-dhafka kala duwanaanshiyaha (CV,%) ee qiimaha logarithmic-ka ee fiirsashada imtixaanku waa ≤5%.Marka fiirsashada muunadku hooseeyo, isku-dhafka kala duwanaanshiyaha (CV,%) ee logarithm-ka fiirsashada ogaanshaha waa ≤10%
Reagennada tayada leh:
Saxnaanta
Saxnaanta hal dufcadood waa inay buuxisaa:
(1) Isku-dhafka kala duwanaanshaha qiimaha Ct (CV,%) ≤5%
Isla muunad isku mid ah ayaa si barbar socda loo tijaabiyaa 10 jeer, natiijaduna waa inay noqotaa mid joogto ah
Waqtiga boostada: Seb-18-2021
