RT Easy II (oo leh gDNase) Master Premix oo loogu talagalay isku-dhafka cDNA-ga ugu horreeya ee PCR ee leh gDNase
Sharaxaada Qalabka:
-Awood waxtar leh oo looga saarayo gDNA, taas oo ka saari karta gDNA qaab-dhismeedka 2 daqiiqo gudahood.
-Nidaamka dib-u-dejinta oo hufan, waxay qaadataa 15 daqiiqo oo keliya in la dhammaystiro isku-darka cDNA-ga ugu horreeya.
Hababka isku dhafan: qaab-dhismeedka ka kooban GC-ga sare iyo qaab-dhismeedka sare ee adag ayaa sidoo kale lagu beddeli karaa hufnaan sare.
-Nidaamka qoraalka dib u celinta dareenka sare, jaantusyada heerka pg sidoo kale waxay heli karaan cDNA tayo sare leh.
-Nidaamka qoraalka dib u celinta ayaa leh xasilooni kulayl sare leh, heerkulka falcelinta ugu fiican waa 42℃, oo wali waxay leedahay wax qabad wanaagsan oo qoraal ah oo 50 ah℃.
Tilmaamaha
25×20µl rxns,100×20µl rxns
RT FududTMII (oo leh gDNase) waa hab-ku-noqod dib-u-dhigis ah oo si gaar ah loogu sameeyay PCR-da-waqtiga dhabta ah si dhakhso ah looga saaro wasakhaynta DNA-ga.5×gDNase Mix waxay si dhakhso ah uga saari kartaa genome-ga haray ee RNA 42°C ilaa 2 daqiiqo, iyada oo si wax ku ool ah uga fogaanaysa faragelinta genome ee natiijooyinka qPCR.
5× RO-fududTMIsku-darka waxa ku jira Foregene Reverse Transcriptase oo ay si gaar ah u soo saartay Foregene, kaas oo ah nooc cusub oo qoraal-guuris ah oo leh xidhiidh RNA ka xoog badan.Nidaamka la hagaajiyay ayaa ka dhigaya heerka gadaasha qoraalka si dhakhso ah, iyo xargaha ugu horreeya ee cDNA ayaa lagu dhammaystiri karaa 42 ° C 15 daqiiqo gudahood.
Nidaamka qoraalka gadaasha ee xirmadan waxa kale oo uu ku hayn karaa firfircooni wanaagsan 50°C.Sidaa darteed, waxa ay aad ugu faa'iido badan tahay qaab-dhismeedka RNA ee kakan oo si fudud ayaa loo qori karaa shaxanka RNA oo leh nuxurka GC sare iyo qaabdhismeedka sare ee adag.
Qaybaha kitka
| 5× gDNase Mix |
| 5× RO-fududTMIsku qas |
| RNase-free ddH2O |
| Tilmaamaha |
Tilmaamaha & faa'iidooyinka
-Awood waxtar leh oo looga saarayo gDNA, taas oo ka saari karta gDNA qaab-dhismeedka 2 daqiiqo gudahood.
-Nidaamka dib-u-dejinta oo hufan, waxay qaadataa 15 daqiiqo oo keliya in la dhammaystiro isku-darka cDNA-ga ugu horreeya.
Hababka isku dhafan: qaab-dhismeedka ka kooban GC-ga sare iyo qaab-dhismeedka sare ee adag ayaa sidoo kale lagu beddeli karaa hufnaan sare.
-Nidaamka qoraalka dib u celinta dareenka sare, jaantusyada heerka pg sidoo kale waxay heli karaan cDNA tayo sare leh.
-Nidaamka qoraalka dib u celinta ayaa leh xasilooni kulayl sare leh, heerkulka falcelinta ugu fiican waa 42℃, oo wali waxay leedahay wax qabad wanaagsan oo qoraal ah oo 50 ah℃.
Codsiga qalabka
Si toos ah loogu isticmaalo PCR-da wakhtiga dhabta ah si qiyaas ahaan loo falanqeeyo muujinta hidda-wadaha.
Waxay si dhakhso ah oo sax ah u baari kartaa raadadka RNA sida fayraska RNA.
Dib u qorista qaab-dhismeedka RNA oo leh nuxurka GC sare ama qaabdhismeedka sare ee adag.
Socodka shaqada
Kaydinta iyo nolosha shelf
Qalabka waa in lagu kaydiyaa -20°C.Ku kaydi alaabta qaboojiyaha heerkulka joogtada ah -20 ° C isla markiiba ka dib markii la helo.Haddii shuruudaha kaydinta ay ku habboon yihiin, alaabtu ma dhimi doonto wax-qabad kasta inta lagu jiro muddada ansaxinta 1-sano.
