Wax calaamado kordhin ah ma jiraan

1.Taq DNA Polymerase ee qalabka ku jira waxa uu lumiyaa dhaqdhaqaaqiisa sababtoo ah kaydinta aan habboonayn ama dhacaysa xirmada.
Talo soo jeedin: Xaqiiji xaaladaha kaydinta qalabka;dib ugu dar qaddarka saxda ah ee Taq DNA Polymerase nidaamka PCR ama iibso Xirmada PCR ee wakhtiga-dhabta ah ee tijaabooyinka la xidhiidha.

2.Waxaa jira inhibitors badan oo Taq DNA Polymerase ku jira template DNA.
Talo-soo-jeedin: Dib-u-nadiifi qaab-dhismeedka ama yaree tirada qaab-dhismeedka la isticmaalay.

3.Mg2 + xooga saaridu kuma haboona.
Talo soo jeedin: Xoojinta Mg2+ ee 2× Real PCR Mix ee aanu bixino waa 3.5mM.Si kastaba ha ahaatee, qaar ka mid ah aasaasayaasha gaarka ah iyo qaab-dhismeedka, fiirsashada Mg2+ ayaa laga yaabaa inay sareeyso.Sidaa darteed, waxaad si toos ah ugu dari kartaa MgCl2 si aad u wanaajiso fiirsashada Mg2+.Waxaa lagu talinayaa in la kordhiyo Mg2+ 0.5mM mar kasta si loo hagaajiyo.

4.Xaaladaha kor u qaadida PCR kuma haboona, isku xigxiga ama xooga saaridu waa khalad.
Talo-soo-jeedin: xaqiiji sax ahaanshiyaha isku xigxiga asaasiga ah iyo furaha oo aan hoos loo dhigin;Haddii calaamada-weyneyntu aysan fiicneyn, isku day inaad hoos u dhigto heerkulka soo jiidashada oo aad si habboon u hagaajiso diiradda aasaasiga ah.

5.Qaddarka template waa mid aad u yar ama aad u badan.
Talo-soo-jeedin: Samee qaab-dhismeed toosan oo dheellitiran, oo dooro fiirsashada template-ka oo leh saamaynta PCR ee ugu fiican ee tijaabada PCR-da ee Waqtiga-dhabta ah.

NTC waxay leedahay qiime aad u sarreeya

1.Wasakhowga reagent ee uu keeno inta lagu jiro hawlgalka.
Talo-soo-jeedin: Ku beddel reageyaal cusub oo loogu talagalay tijaabooyinka PCR ee waqtiga-dhabta ah.

2. faddarayn ayaa dhacday intii lagu jiray diyaarinta nidaamka falcelinta PCR.
Talo soo jeedin: Qaado tallaabooyinka ilaalinta lagama maarmaanka ah inta lagu jiro hawlgalka, sida: xidhashada galoofyada cinjirka ah, adigoo isticmaalaya caarada pipette leh filtar, iwm.

3.Qalabka hore ayaa hoos u dhacay, iyo hoos u dhac ku yimaadda aasaasayaasha ayaa sababi doona cod-weyneeyn aan gaar ahayn.
Talo soo jeedin: Isticmaal SDS-PAGE electrophoresis si aad u ogaatid in furayaasha ay hoos u dhaceen iyo in kale oo ku beddel qalab cusub oo loogu talagalay tijaabooyinka PCR ee wakhtiga dhabta ah.

Dimer Primer ama kordhin aan gaar ahayn

1.Xoojinta Mg2+ kuma habboona.
Talo-soo-jeedin: Xoojinta Mg2+ ee 2× Real PCR EasyTM Mix ee aanu bixino waa 3.5mM.Si kastaba ha ahaatee, qaar ka mid ah aasaasayaasha gaarka ah iyo qaab-dhismeedka, fiirsashada Mg2+ ayaa laga yaabaa inay sareeyso.Sidaa darteed, waxaad si toos ah ugu dari kartaa MgCl2 si aad u wanaajiso fiirsashada Mg2+.Waxaa lagu talinayaa in la kordhiyo Mg2+ 0.5mM mar kasta si loo hagaajiyo.

2. Heerkulka PCR ee annealing ayaa aad u hooseeya.
Talo soo jeedin: Kordhi heerkulka PCR-da ee nuglaanta 1℃ ama 2℃ wakhti kasta.

3.Alaabada PCR waa mid aad u dheer.
Talo soo jeedin: Dhererka alaabta PCR ee wakhtiga-dhabta ah waa in ay ahaataa inta u dhaxaysa 100-150bp, oo aan ka badnayn 500bp.

4.Qalabka hore ayaa hoos u dhacay, iyo hoos u dhigista muraayadaha waxay u horseedi doontaa muuqaalka kor u qaadista gaarka ah.
Talo soo jeedin: Isticmaal SDS-PAGE electrophoresis si aad u ogaatid in furayaasha ay hoos u dhaceen iyo in kale oo ku beddel qalab cusub oo loogu talagalay tijaabooyinka PCR ee wakhtiga dhabta ah.

5.Nidaamka PCR waa mid aan haboonayn, ama nidaamku aad buu u yar yahay.
Talo soo jeedin: Nidaamka falcelinta PCR-ga oo aad u yar ayaa sababi doonta in saxnaanta ogaanshaha ay yaraato.Way fiicantahay in la isticmaalo habka falcelinta ee uu ku taliyay qalabka PCR ee tirada badan si dib loogu socodsiiyo tijaabada PCR-da ee wakhtiga dhabta ah.

Ku celcelinta liidata ee qiimayaasha tirada

1.Qalabka waa cilad.
Soo jeedin: Waxaa laga yaabaa inay jiraan khaladaad u dhexeeya dalool kasta oo PCR ah ee qalabka, taasoo keentay dib u soo saarid xumo inta lagu jiro maaraynta heerkulka ama ogaanshaha.Fadlan hubi sida waafaqsan tilmaamaha qalabka u dhigma.

2. Nadiifinta muunada ma wanaagsana.
Talo-soo-jeedin: Tijaabooyin aan nadiif ahayn waxay u horseedi doonaan dib-u-soo-saar liidata tijaabada, oo ay ku jirto nadiifinta qaab-dhismeedka iyo aasaasayaasha.Way fiicantahay in la nadiifiyo qaab-dhismeedka, iyo aasaasayaasha waxaa sida ugu fiican u nadiifiya SDS-BOGG.

3.The nidaamka PCR diyaarinta iyo wakhtiga kaydinta waa mid aad u dheer.
Talo soo jeedin: U isticmaal nidaamka PCR ee wakhtiga dhabta ah tijaabada PCR isla markaaba diyaarinta ka dib, oo ha kaga tagin meel dheer.

4.Xaaladaha kor u qaadida PCR kuma haboona, isku xigxiga ama xooga saaridu waa khalad.
Talo-soo-jeedin: xaqiiji sax ahaanshiyaha isku xigxiga asaasiga ah iyo furaha oo aan hoos loo dhigin;Haddii calaamada-weyneyntu aysan fiicneyn, isku day inaad hoos u dhigto heerkulka soo jiidashada oo aad si habboon u hagaajiso diiradda aasaasiga ah.

5.Nidaamka PCR waa mid aan haboonayn, ama nidaamku aad buu u yar yahay.
Talo soo jeedin: Nidaamka falcelinta PCR-ga oo aad u yar ayaa sababi doonta in saxnaanta ogaanshaha ay yaraato.Way fiicantahay in la isticmaalo habka falcelinta ee uu ku taliyay qalabka PCR ee tirada badan si dib loogu socodsiiyo tijaabada PCR-da ee wakhtiga dhabta ah.